豬繁殖與呼吸綜合征病毒ELISA抗體檢測試劑盒說明書

【獸用名稱】 

通 用 名:豬繁殖與呼吸綜合征病毒ELISA抗體檢測試劑盒

商 品 名 無

英 文 名:Diagnostic Kit For Antibodies To PorcinReproductive and Respiratory Syndrome Virus（PRRSV Ab）,ELISA

漢語拼音:Zhufanzhiyuhuxibingdu ELISA Kangtijiance Shijihe

【主要組分與含量】

                                          【作用與用途】  用于檢測豬血清中豬繁殖與呼吸綜合征病毒抗體。

【注意事項】

（1）實驗前，將試劑盒所有組分取出置溫箱（25℃± 3） 回溫至少30 分鐘，實驗完成后 放回2～8℃保存。

（2）若試劑盒陰陽性對照、酶標記物出現少量懸浮物，屬正常現象。

（3）請在試劑盒規定的有效期內使用；禁止非同批試劑盒混用。

（4）沒有用完的抗原包被板應貯存在密封塑料袋內，于 2～8℃存放。

（5）避免底物顯色液暴露于強光，避免接觸氧化劑。

（6）先使用血清稀釋板稀釋完所有的待檢血清，再將稀釋好的血清轉移到抗原包被板上， 使反應時間一致。

（7）濃縮洗滌液用蒸餾水或純水稀釋，如果發現有結晶加熱使其溶解后再使用。

（8）嚴格按照操作程序，仔細的吸液、計時，充分洗滌，對于獲得精確的結果是非常必 要的。

（9）用過的材料要無害化處理，處理時遵照當地、區域以及國家法規。

【用法與判定】

1    用法

1. 1    樣品準備  取動物全血，待血液凝固后， 以 4000r/min 離心 10 分鐘，收集血清； 或待血液凝固后自然析出血清，再收集血清。血清應清亮，無溶血。

1.2    洗滌液配制  使用前，將 10 倍濃縮洗滌液用蒸餾水或純水作 10 倍稀釋（例如： 10ml 的濃縮洗滌液加上 90ml 純水），混勻。置 2~8℃保存，可保存 7 日。

1.3    待檢血清和對照的稀釋

1.3. 1    待檢血清的稀釋   用試劑盒提供的樣本稀釋液將樣本作40倍稀釋 （例:將5 μl樣本加至195 μl樣本稀釋液中）。

1.3.2    對照的稀釋  陰陽對照不用稀釋。

1.4    操作步驟

1.4. 1    加樣：根據樣本數量，取所需板條，檢測時，設陰、陽性對照各2孔，分別加入不用稀釋的陰、陽性對照血清100 μl于相應孔中（可不設空白對照）。其余為樣本孔，每孔加100 μl用樣本稀釋液稀釋好的樣本。

1.4.2    溫育：加樣后，蓋上蓋板膜，置37 ℃溫育30 min。

1.4.3    洗板：甩去孔內液體，用洗滌液注滿反應板孔，靜置10 s，直接甩出，洗滌3次，最后一次洗滌后吸干板內液體。

1.4.4    加酶：每孔加酶標記物100 μl。

1.4.5    溫育：加好酶標記物的反應板蓋好蓋板膜，置37 ℃溫育30 min

1.4.6    洗板：同步驟1.4.3。

1.4.7    顯色：每孔加顯色劑100 μl，振蕩混勻，37 ℃避光反應10 min。

1.4.8    終止：每孔加終止液50 μl，振蕩10 s，充分混勻，終止后即讀數。

1.4.9    讀數：以450 nm/ 630 nm雙波長檢測，讀取各孔吸光度值（OD值）。充分混勻，終止后即讀數。

2    判定

2. 1    成立條件  陽性對照孔的平均OD值≥0.60，陰性對照孔的平均OD值＜0.40。

2.2    結果判定  樣品中抗體存在與否，或樣本中抗體的相對水平的高低由S/P值決定，S/P值計算時按以下方式處理:

S/P=(樣本OD450/630值－NC)/(PC－NC)

其中NC表示陰性對照孔平均OD450/630值（若小于0.05，則按照0.05計算），

PC表示陽性對照孔平均OD450/630值；

當樣本的S/P≥0.20時判為陽性；

樣品S/P值＜0.20時判為陰性。

【規格】  96 孔/盒或192 孔/盒

【貯藏與有效期】  2~8℃保存，有效期為 12 個月 

僅供科研使用